Мобильная версия

Журнал «Боль. Суставы. Позвоночник» Том 13, №1, 2023

Роль регуляторних мікро-РНК у процесах запалення та продукції фактора некрозу пухлини альфа у хворих на ревматоїдний артрит

Авторы: Гнилорибов А.М. (1), Гринь В.К. (1), Узун К.С. (2), Потапов Ю.О. (3), Заплотна Г.О. (4), Мензарар Г.О. (5)
(1) — Національний інститут серцево-судинної хірургії імені М.М. Амосова НАМН України, м. Київ, Україна
(2) — Київський медичний університет, м. Київ, Україна
(3) — Національний медичний університет, м. Лиман, Україна
(4) — Національний медичний університет ім. О.О. Богомольця, м. Київ, Україна
(5) — Інститут невідкладної і відновної хірургії ім. В.К. Гусака НАМН України, м. Київ, Україна

Рубрики: Ревматология, Травматология и ортопедия

Разделы: Клинические исследования

Актуальність. Мікро-РНК є фундаментальними агентами посттранскрипційного контролю експресії генів. Останніми роками з’являється все більше робіт щодо можливої ролі мікро-РНК при ревматоїдному артриті (РА). Дослідження ролі мікро-РНК та взаємозв’язку із синтезом фактора некрозу пухлини α (ФНП-α) є дуже перспективними для розуміння патогенезу та лікування РА й інших автоімунних захворювань. Мета дослідження: вивчити роль регуляторних мікро-РНК у процесах запалення та можливий зв’язок із продукцією ФНП-α у хворих на РА. Матеріали та методи. Обстежено 29 хворих на активний РА та 20 здорових осіб (контроль). Усім обстеженим основної групи проведено дослідження 16 мікро-РНК. Їх вибір було обґрунтовано попередніми дослідженнями й теоретичними висновками (за інформацією бази даних miRWalk). У крові хворих визначали ревматоїдний фактор (РФ), рівень антитіл до циклічних пептидів, які містять цитрулін (а-ЦЦП), С-реактивний білок (СРБ), рівні ФНП-α (сироваткового, спонтанного та стимульованого). Результати. Статистичний аналіз продемонстрував вірогідну гіперекспресію мікро-РНК miR-221, miR-203, miR-146b, miR-132, miR-21 і miR-17-3р та пригнічення синтезу miR-223 у хворих на РА. Показано активацію синтезу ФНП-α у спокої та готовність мононуклеарів до підвищеної продукції ФНП-α після стимуляції в осіб з РА. Виявлено відмінності рівнів відносної експресії деяких мікро-РНК у серопозитивних і серонегативних (за а-ЦЦП і РФ) груп пацієнтів, але високовірогідною була лише гіперекспресія у хворих на РА miR-155. Уперше виявлено можливий зв’язок між продукцією ФНП-α та мікро-РНК miR-29 і miR-155, а також кореляцію між miR-16, miR-99b і miR-203 та рівнями СРБ. Висновки. Отримані результати щодо профілю мікро-РНК при РА дозволяють виділити окремі «найцікавіші» мікро-РНК для подальшого вивчення патогенезу, їх ролі в запаленні, для з’ясування можливостей підбору біологічних лікарських засобів (а саме інгібіторів ФНП-α) та прогнозування ефективності лікування інгібіторами ФНП-α.

Background. Micro-RNAs are fundamental agents of post-transcriptional control of gene expression. In recent years many works have appeared on the possible role of micro-RNAs in rheumatoid arthritis (RA). Studies of the role of micro-RNA and the relationship with the synthesis of tumor necrosis factor-α (TNF-α) are very promising for understanding the pathogenesis and treatment of RA and other autoimmune diseases. The purpose of the research was to study the role of regulatory micro-RNAs in inflammatory processes and the possible connection with the production of TNF-α in patients with RA. Materials and methods. 29 patients with active RA and 20 healthy individuals (control) were examined. All subjects were examined for 16 micro-RNAs. The choice of micro-RNA was based on previous studies and theoretical conclusions (according to the miRWalk database). Rheumatoid factor, the level of antibodies to cyclic peptides containing citrulline, C-reactive protein (СRP), levels of TNF-α (serum, spontaneous, and stimulated) were determined in the blood of patients. Results. Statistical analysis demonstrated significant overexpression of miR-221, miR-203, miR-146b, miR-132, miR-21 and miR-17-3p and inhibition of miR-223 synthesis in RA patients. The activation of TNF-α synthesis at rest and the increased production of TNF-α by mononuclear cells after stimulation in RA were shown. Differences in the levels of relative expression of some micro-RNAs between seropositive and seronegative groups of RA patients were found, but only hyperexpression of miR-155 was highly reliable. For the first time, a possible relationship between TNF-α production and miR-29 and miR-155 micro-RNAs, as well as a correlation between miR-16, miR-99b and miR-203 and CRP levels, was revealed. Conclusions. The obtained data on the profile of micro-RNAs in RA makes it possible to distinguish the most “interesting” micro-RNAs for further study of pathogenesis, their role in inflammation, to study the choice of TNF-α inhibitors, and predicting the effectiveness of that treatment.

Ключевые слова

ревматоїдний артрит; мікро-РНК; фактор некрозу пухлини α; мононуклеари крові

rheumatoid arthritis; micro-RNA; tumor necrosis factor-α; blood mononuclear cells

doi: http://dx.doi.org/10.22141/pjs.13.1.2023.353

Вступ

Сьогодні відомо більше ніж 700 різних молекул мікро-РНК (miR), і вони регулюють понад 30 % генів людини. MiR впливають на експресію генів, які кодують інформацію про структуру білків, що робить їх одними з найважливіших генних регуляторів.

Дисрегуляція рівнів експресії цих молекул може бути маркером багатьох захворювань, зокрема пухлинних процесів. Останніми роками активно досліджується їхня роль ще й у патогенезі автоімунного запалення. Упродовж років велику увагу приділяли вивченню дії мікро-РНК як онкогенів. Так, наприклад, було встановлено, що в багатьох пухлинах спостерігається виражена експресія miR-155, miR-21 і miR-146, тоді як експресія miR-15 і miR-16 пригнічена в деяких пухлинах, що дозволяє вважати їх діючими генами-інгібіторами пухлини.

Результати першої спроби дослідження профілю експресії мікро-РНК у пацієнтів із системним червоним вовчаком (СЧВ) було опубліковано 2007 року. У біоптатах нирок хворих із СЧВ було виявлено 36 мікро-РНК, експресія яких була збільшена, і 30, експресія яких була знижена [1, 2].

У низці робіт описано результати вивчення експресії мікро-РНК у пацієнтів з ревматоїдним артритом (РА). Порівняно з хворими на остеоартрит спостерігався значно нижчий рівень експресії miR-124а, яка відіграє ключову роль у регуляції проліферації синовіальних фібробластів і продукції ними цитокінів [3, 4]. Рівні експресії miR-146а й miR-155 у хворих з РА були збільшені, тоді як відомо, що експресія miR-146а регулюється прозапальними цитокінами: фактором некрозу пухлини α (ФНП-α) та інтерлейкіном-1 (ІЛ-1) [5].

Прозапальні цитокіни є важливими медіаторами ревматичних захворювань. ФНП-α — один із найперших цитокінів, роль якого була доведена в патогенезі автоімунних захворювань, зокрема РА. Ініціююча роль ФНП-α у каскаді прозапальних цитокінів зумовлює його використання як мішені для терапевтичного впливу, наприклад, застосування блокаторів ФНП-α у лікуванні РА й багатьох інших хронічних запальних захворювань [6, 7]. Регуляторна роль miR-155 у продукції ФНП-α була показана in vivo на моделях у мишей: виявилося, що miR-155–/– В-клітини демонстрували дефіцит продукції ФНП-α, тоді як у мишей з підвищеною експресією miR-155 у В-клітинах спостерігали посилену продукцію ФНП-α в сироватці у відповідь на введення ліпополісахариду, і вони були більш сприйнятливі до ліпополісахарид-індукованого шоку [8]. Хоча ще остаточно не зрозуміло, яким чином мікро-РНК і білки, які зв’язують РНК, спільно регулюють стабільність і трансляцію матричної РНК ФНП-α і в такий спосіб впливають на концентрацію ФНП-α в організмі, безсумнівно, виявлення нового рівня регуляції продукції ФНП-α є важливою подією, і потрібні подальші дослідження в цій царині.

Таким чином, мікро-РНК є фундаментальними агентами посттранскрипційного контролю експресії генів. Дослідження взаємозв’язку мікро-РНК і синтезу ФНП-α може виявитися дуже перспективним для розуміння патогенезу та лікування автоімунних захворювань.

Метою нашого дослідження було вивчити роль регуляторних мікро-РНК у процесах запалення та можливий зв’язок із продукцією ФНП-α у хворих на РА.

Матеріали та методи

Об’єкт дослідження

Нами обстежено 29 хворих на РА (усі — жінки). Хворі перебували під наглядом у Центрі імунобіологічного лікування Інституту невідкладної і відновної хірургії (ІНВХ) імені В. Гусака НАМН України (м. Київ). Вік обстежених становив від 22 до 63 років, середній вік 43,3 ± 4,7 року. Середня тривалість захворювання становила 5,8 ± 1,5 року. Діагноз активного РА було встановлено згідно з критеріями Американської колегії ревматологів (ACR)/Європейського альянсу асоціацій ревматологів (EULAR) для хворих з активним захворюванням, і показник активності захворювання (DAS28-СРБ) становив > 3,2 бала. Усі хворі отримували протиревматичні препарати, які модифікують хворобу (DMARD): 24 пацієнти — метотрексат у дозі 10–17,7 мг/д, 5 пацієнтів— лефлуномід. 21 хворий приймав метилпреднізолон (середня добова доза 6,4мг). В анамнезі у хворих не було зареєстровано пухлин чи серйозних серцево-судинних розладів. Групу контролю становили 20 здорових осіб (усі — жінки, середній вік 38,7 ± 5,2 року). Письмова інформована згода на участь у дослідженні була отримана від усіх учасників, і дослідження проводили відповідно до умов Гельсінської декларації за схвалення Комісії з питань етики ІНВХ ім. В.К. Гусака НАМН України (протокол № 3 від 10.02.2016 р.).

На підставі попередніх результатів лабораторних досліджень ми розділили пацієнтів з РА на дві групи: з позитивними антитілами до циклічних пептидів, що містять цитрулін (а-ЦЦП), та ревматоїдним фактором (РФ) (а-ЦЦП(+)РФ(+)) (24 пацієнти, 82,8 %) і негативними а-ЦЦП та РФ (а-ЦЦП(–)РФ(–)) (5 пацієнтів, 17,2 %).

Методи дослідження

У всіх обстежених визначали РФ, рівень а-ЦЦП, С-реактивного білка (СРБ) кількісним методом, сумарні IgA, IgM, IgG, рівні ФНП-α сироваткового, спонтанного та стимульованого, загального холестерину, вміст білків системи комплементу С3 і С4.

Визначення РФ, рівнів а-ЦЦП, СРБ, сумарних IgA, IgM, IgG, загального холестерину, вмісту білків системи комплементу С3 і С4 виконували на автоматичному біохімічному аналізаторі Cobas 6000 (Roche, Швейцарія) з використанням стандартних наборів реагентів компанії Roche (Швейцарія).

Концентрацію фактора некрозу пухлини визначали в цільній крові та в сироватці. Для дослідження індукованої продукції ФНП-α у флакон додавали 20 мкл розчину фітогемаглютиніну. Вимірювання здійснювали методом твердофазного імуноферментного аналізу (ELISA) з використанням набору Human TNF-α (Bender MedSystems, USA) згідно з інструкціями та в рекомендованих розведеннях.

Усім пацієнтам визначали експресію таких 16 мікро-РНК (miR): miR-146a, miR-146b, miR-155, miR-125b, miR-203, miR-369-3p, miR-16, miR-17-3p, miR-99b, miR-29, miR-21, miR-132, miR-143, miR-145, –miR-221, miR-223. Вибір мікро-РНК було зумовлено попередніми дослідженнями й теоретичними висновками (за інформацією з бази даних miRWalk: http://mirwalk.umm.uni-heidelberg.de). Для виділення мікро-РНК використовували набір NucleoSpin® miRNA (MACHEREY-NAGEL Gmb&Co., Німеччина). Виділення мононуклеарних клітин проводили на градієнті щільності фікол-урографіну. Для проведення зворотної транскрипції застосовували набір TaqMan® MicroRNA Reverse Transcription Kit (AppliedBiosystems, США). Концентрацію РНК вимірювали на спектрофотометрі Genesys 10UV (Thermo Spectronic, США) за довжини хвилі 260 нм. Відтанували праймери для зворотної транскрипції, специфічні до обраних мікро-РНК. Як внутрішній контроль використовували малу ядерну РНК (мяРНК, snRNA). Для аналізу застосовували праймери TaqMan® MicroRNA Reverse Transcription (RT) Kit (AppliedBiosystems, США). Для проведення ампліфікації використовували двадцятикратні праймери TaqMan® MicroRNA Assays і TaqMan® Universal PCR Master Mix (AppliedBiosystems, США).

Рівень експресії мікро-РНК оцінювали щодо рівня експресії мяРНК у даному зразку згідно з різницею циклів, на яких перетинають граничну лінію криві накопичення мяРНК даного зразка і мікро-РНК, яку аналізували (∆Ct).

Відносний рівень експресії мікро-РНК оцінювали щодо рівня експресії мяРНК у даному зразку за стандартною формулою:

де RЕ — рівень відносної експресії мікро-РНК; ∆∆Ct— різниця циклів, на яких перетинають граничну лінію криві накопичення мяРНК даного зразка і мікро-РНК, яку аналізували.

У групі хворих на РА нами досліджено всі наведені вище біохімічні й імунологічні маркери запалення та рівень експресії мікро-РНК (∆Ct), тоді як у контрольній групі вивчали тільки експресію мікро-РНК.

Статистичний аналіз

Усі отримані дані обробляли статистично (параметричний, непараметричний, кореляційний, одно- та багатофакторний дисперсійний комп’ютерний аналіз отриманих результатів) (статистична програма STATISTICA for Windows, версія 6.0). Отримані дані при непараметричному розподілі подавали у вигляді медіани та найменшого й найбільшого значень (Me, Min, Max), а також у вигляді середнього арифметичного (М) і його стандартного відхилення (SD) для порівняння отриманих результатів з даними інших дослідників. Відмінності вважали вірогідними при рівні значущості р < 0,05.

Результати

Отримані результати експресії різних miR у досліджених та в групі контролю наведені у табл. 1.

Як видно з таблиці, у здорових найнижча експресія була у МПК miR-17-p (–11,28 ± 2,42), miR-99b (–12,67 ± 4,14), miR-146a (–29,06 ± 3,22), miR-203 (–15,31 ± 1,82), miR-221 (–15,71 ± 1,11). Більш високою експресія у здорових була при дослідженні miR-16 (–0,05 ± 4,95, me 2,11, max 4,15, min –11,81), miR-223 (3,47 ± 1,13).

За даними табл. 1, при зіставленні рівнів miR у МНК хворих та здорових вірогідні відмінності відзначалися в 7 рівнях із 16 мікро-РНК: miR-17-3p (p = 0,04), –miR-21 (p = 0,02), miR-132 (p = 0,02), miR-146b (p = 0,01), –miR-203 (p = 0,04), miR-221 (p = 0,04) і miR-223 (p = 0,01). У всіх випадках відзначено вірогідну стимуляцію експресії зазначених вище miR, крім miR-223, яка була вірогідно інгібована.

Профіль вірогідної експресії miR у хворих на РА порівняно зі здоровими особами наведено на рис. 2.

Таким чином, при аналізі нами було виокремлено найважливіші мікро-РНК, зміни експресії яких відбуваються при РА (рис. 3).

При дослідженні рівня ФНП-α у сироватці крові хворих на РА він становив 9,72 ± 13,73 пг/мл, спонтанний ФНП-α — 122,61 ± 102,07 пг/мл, ФНП-α стимульований — 1145,81 ± 951,53 пг/мл. Аналогічні показники у здорових з групи контролю були дещо нижчими: ФНП-α у сироватці крові — 5,43 ± 4,32 пг/мл, спонтанний ФНП-α — 799,41 ± 824,87 пг/мл, ФНП-α стимульований — 1050,11 ± 912,22 пг/мл. Це свідчить про активацію синтезу ФНП-α у спокої та про «готовність» мононуклеарів до підвищеної продукції ФНП-α після стимуляції при РА, що збігається з нашим уявленням про значну роль цього прозапального цитокіну в патогенезі ревматоїдного синовіту й запалення при цьому захворюванні взагалі (але вірогідних відмінностей показників у групі контролю та в основній групі не було).

Вірогідні відмінності (p < 0,01) було виявлено лише в рівнях відносної експресії мікро-РНК miR-155, що була вищою у групі а-ЦЦП(+)РФ(+), ніж у групі а-ЦЦП(–)РФ(–) у хворих з РА.

Результати вивчення кореляційних залежностей між маркером запалення СРП, рівнями ФНП-α та профілем мікро-РНК подані в табл. 2.

Як можна побачити з таблиці, виявлено виражену позитивну кореляцію між miR-16, miR-99b та miR-203 і рівнями СРП (коефіцієнти кореляції r — 0,55, 0,53 та 0,81 відповідно), що може свідчити про вклад зазначених мікро-РНК у запальний процес при РА.

Обговорення

РА є системним автоімунним захворюванням, яке характеризується хронічним запаленням синовіальної тканини, що призводить до необоротних ушкоджень суглоба. Важливу роль у патогенезі РА відіграють прозапальні цитокіни, зокрема інтерлейкіни (ІЛ) ІЛ-6, –IЛ-1β і ФНП-α. Останніми роками було проведено низку досліджень, спрямованих на виявлення зміни експресії мікро-РНК при РА. Встановлено, що регуляція «малих» РНК істотно порушена у різних тканинах при РА, як-от синовіальна тканина та кров (як в мононуклеарних клітинах, так і в сироватці крові). Основні порушення експресії miR при РА наведені у табл. 3 [9, 10].

J. Stanczyk та співавт. показали підвищення рівня miR-146a і miR-155 у синовіальних фібробластах при РА й виявили специфічний профіль експресії різних мікро-РНК, який помітно відрізнявся при РА й ОА [11–13]. Беручи до уваги той факт, що miR-155 пригнічує експресію двох матричних металопротеїназ (ММР-ендопептидів, залучених до руйнування міжклітинного матриксу) — ММР-1 і ММР-3, автори дійшли висновку, що ця мікро-РНК може бути причетна до модулювання деструктивних процесів у суглобах при РА. Наші дані підтверджують результати їхнього дослідження, оскільки ми також виявили порівняно з контролем підвищення рівня експресії miR-146а у мононуклеарах периферичної крові хворих на РА, але не вірогідне. Проте звертає на себе увагу той факт, що ми виявили при РА зниження експресії miR-155, вірогідно не значуще. Можливо, це пояснюється різним типом біоматеріалу, використаного в дослідженнях.

Нами було обрано вивчення мононуклеарів периферійної крові як найменш інвазивне й описане в низці робіт закордонних авторів. Крім того, експресія miR-16 і miR-146а у плазмі й відношення експресії цих мікро-РНК у синовіальній рідині до рівня експресії в плазмі вірогідно корелюють з активністю захворювання [6].

Після активації toll-подібних рецепторів (TLRs) патогенними стимулами miR-155-5p функціонує як посттранскрипційний регулятор вродженого імунітету. MiR-155-5p пригнічує негативні регулятори запалення, включно з інозитол-поліфосфат-5-фосфатазою (INPP5D, що також позначається як SHIP1) і супресором цитокінового сигнального шляху 1 (SOCS1), пригнічення яких сприяє виживанню клітин, їх росту, міграції та відповіді на патогени. Окрім підтримки активації механізмів захисту, miR-155-5p здатний обмежувати NF-κB-залежну запальну відповідь [10], що свідчить про варіювання функцій miR-155 на різних стадіях запальної відповіді.

В активованих В- і Т-лімфоцитах спостерігається підвищення експресії miR-155, те саме відбувається у макрофагах і дендритних клітинах. MiR-155 — найважливіший фактор розвитку й дозрівання лімфоцитів. Запальна відповідь на тригери, як-от ФНП-α, залучає макрофаги за участі miR-155. При автоімунних захворюваннях, як-от РА, експресія miR-155 підвищена у тканинах пацієнтів і синовіальних фібробластах [11].

MiR-146 переважно залучена у регуляцію запалення й інші процеси функціонування вродженого імунітету [8]. MiR-146 також стимульована у суглобовому хрящі при остеоартриті та може залучатися у патогенез цього захворювання [8]. Імовірно, –miR-146 бере участь у запаленні разом з іншою мікро-РНК — –miR-155. Підвищення експресії miR-146 викликають такі фактори запалення, як ІЛ-1 і ФНП-α [6]. –MiR-146 регулює роботу багатьох мішеней, які переважно належать до сімейства toll-like рецепторів, що викликає відповідь на дію цитокінів як частини системи вродженого імунітету. MiR-146 діє у системі зворотної відповіді для точної корекції запалення. MiR-223 є гіперекспресованою у T-лімфоцитах при РА, що підтверджує важливу роль цих клітин у патогенезі захворювання.

Попередній аналіз показав, що мікро-РНК також були добрими предикторами відповіді на лікування метотрексатом [16–20]. Hsa-miR-132-3p, hsa-miR-146a-5p і hsa-miR-155-5p є потенційними біомаркерами чутливості до терапії метотрексатом. Це може стати важливим фактором для вибору ефективної базисної терапії при лікуванні хворих на РА.

Незважаючи на те, що ми досліджували не плазму, а саме мононуклеари крові, й експресія miR-146а при РА не відрізнялася вірогідно від такої в групі контролю, ми виявили підвищення (хоча й не вірогідне) експресії miR-16 у хворих на РА осіб. Відповідно до літературних даних, ця мікро-РНК регулює клітинний цикл, затримуючи клітини на стадії мітозу. Вона впливає на цілий ряд цільових генів: CDK6 (кіназа, регулює G1), CDC27 (регулює мітоз і G1), C10orf46 (слабко вивчений, регулює розвиток клітин), C9orf42, CARD10 (активатор сигнального шляху NF-κB, регулює проліферацію й розвиток клітин) тощо. Одночасне вимкнення декількох цільових генів призводить до збільшення кількості клітин, що завмерли у фазі ділення. Крім того, імовірно, вона негативно регулює антиапоптичний білок BCL2. Концентрація miR-16 велика у клітинах, пов’язаних із запаленням (моноцитах, нейтрофілах, B-клітинах, CD4+ і CD8+ T-клітинах). Вона необхідна для швидкої деградації медіаторів запалення (наприклад, ФНП-α), експресія яких підвищується при автоімунних захворюваннях. З іншого боку, високий вміст цієї мікро-РНК у прозапальних клітинах обмежує продукцію прозапальних медіаторів. Імовірно, miR-16 також вступає у взаємодію з іншими мікро-РНК, регулюючи імунну відповідь.

Крім посилення експресії цих мікро-РНК ми виявили також значне підвищення рівня експресії miR-17-3р у групі з РА порівняно з контролем. Як відомо, ця мікро-РНК входить до кластера miR-17-92, що відіграє критичну роль у збалансуванні процесів проліферації й апоптозу, синергічно впливаючи на велику кількість цільових мікро-РНК.

Відсутність вірогідних відмінностей у рівні відносної експресії між серопозитивними й серонегативними за а-ЦЦП і РФ групами пацієнтів (крім експресії miR-155) не дає нам на цьому етапі досліджень вагомих підстав розділяти РА на дві форми, ґрунтуючись на проаналізованих нами показниках. Проте відмінність у виявлених кореляціях між маркерами запалення та профілем мікро-РНК дозволяє нам припустити, що до патогенезу а-ЦЦП(+)РФ(+) й а-ЦЦП(–)РФ(–) РА можуть бути залучені різні молекулярно-біологічні механізми.

Обмеження дослідження. Наші результати мають достатню точність, проте для отримання більш вірогідних результатів необхідне обстеження на більшій вибірці пацієнтів. Важливим є проведення проспективних досліджень на великих когортах хворих на РА з метою оцінки інформативності отриманих результатів.

Висновки

Нами визначене вірогідне підвищення експресії мікро-РНК при РА: miR-221, miR-203, miR-146b, –miR-132, miR-21 і miR-17-3р та пригнічення синтезу miR-223 у хворих з РА.

Виявлено цікавий факт зниження експресії miR-155 у хворих на РА з наявністю а-ЦЦП та підвищеного рівня РФ порівняно з серонегативними пацієнтами. Рівень експресії miR-146а/b, miR-369-3р, miR-125b і miR-29 при цьому вірогідно у цих групах та в групі контролю не відрізнявся. Отримані результати узгоджуються з літературними даними, відповідно до яких miR-155 і miR-203 посилюють продукцію прозапальних цитокінів і регулюють експресію матричних металопротеїназ, модулюючи деструкцію суглобів при РА.

Виявлено виражену позитивну кореляцію між –miR-16, miR-99b та miR-203 та рівнями СРП, що може свідчити про вклад зазначених мікро-РНК у запальний процес при РА.

Нами вперше виявлено можливий зв’язок між продукцією ФНП-α та деякими мікро-РНК (позитивна кореляція з miR-29 та негативна із miR-155). Одним із можливих наслідків цього факту може стати залучення вищевказаних мікро-РНК до підбору біологічних препаратів (а саме інгібіторів ФНП-α) і прогнозування ефективності лікування хворих на РА.

Конфлікт інтересів. Автори заявляють про відсутність конфлікту інтересів та власної фінансової зацікавленості при підготовці даної статті.

Інформація про фінансування. Фінансова підтримка виконана відділом фундаментальних досліджень Інституту невідкладної і відновної хірургії ім. В.К. Гусака НАМН України, м. Київ, Україна; ТОВ «Нова діагностика», м. Київ, Україна.

Інформація про внесок кожного автора в підготовку статті. Гнилорибов А.М. — концепція та дизайн дослідження, аналіз отриманих даних, корекція тексту; Гринь В.К. — концепція та дизайн дослідження, збір та обробка матеріалу; Узун К.С. — відбір пацієнтів, збір та обробка матеріалу, статистична обробка, написання тексту; Потапов Ю.О., Заплотна Г.О. — аналіз отриманих даних, корекція тексту; Мензарар Г.О. — аналіз даних літературних джерел, написання тексту.

Отримано/Received 12.01.2023

Рецензовано/Revised 19.02.2023

Прийнято до друку/Accepted 27.02.2023

Список литературы

Dai Y., Sui W., Lan H., Yan Q., Huang H., Huang Y. Comprehensive analysis of microRNA expression patterns in renal biopsies of lupus nephritis patients. Rheumatol. Int. 2009 May. 29(7). 749-54. doi: 10.1007/s00296-008-0758-6. Epub 2008 Nov 8. PMID: 18998140.
Navarro-Quiroz E., Pacheco-Lugo L., Lorenzi H. High-Throughput Sequencing Reveals Circulating –miRNAs as Potential Biomarkers of Kidney Damage in Patients with Systemic Lupus Erythematosus PLоS ONE. 2016 November. 11. 1-12. doi: 10.1371/journal.pone.0166202.
Nakamachi Y., Kawano S., Takenokuchi M. et al. MicroRNA-124a is a key regulator of proliferation and monocyte chemoattractant protein 1 secretion in fibroblast-like synoviocytes from patients with rheumatoid arthritis. Arthritis Rheum. 2009. 60. 1294-1304. doi: 10.1002/art.24475. PMID: 19404929.
Kawano S., Nakamachi Y. MiR-124a as a key regulator of proliferation and MCP-1 secretion in synoviocytes from patients with rheumatoid arthritis. Ann. Rheum. Dis. 2011. 70(Suppl. 1). i88-i91. doi:10.1136/ard.2010.138669.
Nakasa T., Miyaki S., Okubo A. et al. Expression of microRNA-146 in rheumatoid arthritis synovial tissue. Arthritis Rheum. 2008. 58. 1284-1292. PMID: 18438844. doi: 10.1002/art.23429.
Xiaole P., Qing W., Wenming L. et al. Comprehensive overview of microRNA function in rheumatoid arthritis. Bone Research. 2023. 11. 8. doi: 10.1038/s41413-023-00244-1.
Ian K.Y.L., Jia X.Ch., Chak S.L., Vera S.F.Ch. MicroRNA-mediated immune regulation in rheumatic diseases. Cancer Letters. 2018. Vol. 431(1). 201-212. doi: 10.1016/j.canlet.2018.05.044.
Schulte L.N., Westermann A.J., Vogel J. Differential activation and functional specialization of miR-146 and miR-155 in innate immune sensing. Nucleic Acids Res. 2013. 41(1). 542-553. doi: 10.1093/nar/gks1030. PMID: 23143100.
Santisa R., Liepelta A., Mossanena J.C. et al. A miR-155 targets Caspase-3 mRNA in activated macrophages. RNA Biology. 2016. 13(1). 43-58. doi: 10.1080/15476286.2015.1109768. PMID: 26574931.
Faraoni I., Antonetti F.R., Cardone J., Bonmassar E. MiR-155 gene: a typical multifunctional micro–RNA. Biochim. Biophys. Acta. 2009. 1792(6). 497-505. doi: 10.1016/j.bbadis.2009.02.013. PMID: 19268705.
Elton T.S., Selemon H., Elton S.M. et al. Regulation of the MIR155 host gene in physiological and pathological processes. Gene. 2013. 532(1). 1-12. doi: 10.1016/j.gene.2012.12.009.
Taïbi F., Metzinger-Le V., Meuth, Massy Z.A., Metzinger L. miR-223: An inflammatory oncomiR enters the cardiovascular field. Biochim. Biophys. Acta. 2014 Jul. 1842(7). 1001-9. doi: 10.1016/j.bbadis.2014.03.005. Epub 2014 Mar 18.
Tili E., Croce C.M., Michaille J.J. MiR-155: on the crosstalk between inflammation and cancer. Int. Rev. Immunol. 2009. 28(5). 264-84. doi: 10.1080/08830180903093796. PMID: 19811312.
Vasilatou D., Papageorgiou S., Pappa V. et al. The role of microRNAs in normal and malignant hematopoiesis. Eur. J. Haematol. 2010 Jan 1. 84(1). 1-16. doi: 10.1111/j.1600-0609.2009.01348.x. PMID: 19744129. Epub 2009 Sep 10.
Ankita Singh, Pradeepta Sekhar Patro, Amita Aggarwal. MicroRNA-132, miR-146a, and miR-155 as potential biomarkers of methotrexate response in patients with rheumatoid arthritis. Clinical Rheumatology. 2019. Vol. 38. 877-884. doi: 10.1007/s10067-018-4380-z. PMID: 30511295.
Sode J., Krintel S.B., Carlsen A.L. et al. Plasma MicroRNA Profiles in Patients with Early Rheumatoid Arthritis Responding to Adalimumab plus Methotre–xate vs Methotrexate Alone: A Placebo-controlled Clinical Trial. J. Rheumatol. 2018 Jan. 45(1). 53-61. doi: 10.3899/jrheum.170266. Epub 2017 Nov 15.
Ankita Singh, Ramnath Misra, Amita Aggarwal. Baseline adenosine receptor mRNA expression in blood as predictor of response to methotrexate therapy in patients with rheumatoid arthritis. Rheumatol Int. 2019 Aug. 39(8). 1431-1438. doi: 10.1007/s00296-019-04344-2. Epub 2019 Jun 15.
Yaqiong Liu, Yonghong Han, Huanru Qu et al. Correlation of microRNA expression profile with clinical response to tumor necrosis factor inhibitor in treating rheumatoid arthritis patients: A prospective cohort study. J. Clin. Lab. Anal. 2019 Sep. 33(7). e22953. doi: 10.1002/jcla.22953. Epub 2019 Jun 27.
Fatemeh Safari, Elia Damavandi, Abdol-Rahman Rostamian et al. Plasma Levels of MicroRNA-146a-5p, MicroRNA-24-3p, and MicroRNA-125a-5p as Potential Diagnostic Biomarkers for Rheumatoid Arthris. Iran. J. Allergy Asthma Immunol. 2021 Jun 6. 20(3). 326-337. doi: 10.18502/ijaai.v20i3.6334.
Jifeng Tang, Junyu Lin, Ziqing Yu et al. Identification of circulating miR-22-3p and let-7a-5p as no–vel diagnostic biomarkers for rheumatoid arthritis. Clin. Exp. Rheumatol. 2022 Jan. 40(1). 69-77. doi: 10.55563/clinexprheumatol/4me6tg. Epub 2021 Feb 9.