Інформація призначена тільки для фахівців сфери охорони здоров'я, осіб,
які мають вищу або середню спеціальну медичну освіту.

Підтвердіть, що Ви є фахівцем у сфері охорони здоров'я.



СІМЕЙНІ ЛІКАРІ ТА ТЕРАПЕВТИ

НЕВРОЛОГИ, НЕЙРОХІРУРГИ, ЛІКАРІ ЗАГАЛЬНОЇ ПРАКТИКИ, СІМЕЙНІ ЛІКАРІ

КАРДІОЛОГИ, СІМЕЙНІ ЛІКАРІ, РЕВМАТОЛОГИ, НЕВРОЛОГИ, ЕНДОКРИНОЛОГИ

СТОМАТОЛОГИ

ІНФЕКЦІОНІСТИ, СІМЕЙНІ ЛІКАРІ, ПЕДІАТРИ, ГАСТРОЕНТЕРОЛОГИ, ГЕПАТОЛОГИ

ТРАВМАТОЛОГИ

ОНКОЛОГИ, (ОНКО-ГЕМАТОЛОГИ, ХІМІОТЕРАПЕВТИ, МАМОЛОГИ, ОНКО-ХІРУРГИ)

ЕНДОКРИНОЛОГИ, СІМЕЙНІ ЛІКАРІ, ПЕДІАТРИ, КАРДІОЛОГИ ТА ІНШІ СПЕЦІАЛІСТИ

ПЕДІАТРИ ТА СІМЕЙНІ ЛІКАРІ

АНЕСТЕЗІОЛОГИ, ХІРУРГИ

"News of medicine and pharmacy" 10(245) 2008

Back to issue

Экспериментальное исследование (in vitro) микробного антагонизма Saccharomyces boulardii и полирезистентных штаммов, полученных из тонкой кишки, при синдроме интенсивного бактериального роста

Authors: В.А. МАГЛЕВАННЫЙ, Л.М. КУНОВСКАЯ, А.О. ГАРБУЗОВ, В.В. КУНОВСКИЙ, Львовский национальный медицинский университет им. Данила Галицкого

Categories: Gastroenterology

Sections: Clinical researches

print version

Желудочно-кишечный тракт — это сложная экологическая система, которая объединяет разнообразные по своим биологическим характеристикам биотопы. Понятие «нормальная микрофлора», характерное для данного биотопа, может быть отождествлено с эволюционно сформированным резидентным микробным пейзажем, находящимся в состоянии динамического равновесия с факторами внешней среды и микроорганизмом. Количественные и качественные колебания состава микрофлоры определяются индивидуальными анатомо-физиологическими особенностями ЖКТ, возрастом, характером питания, эпидемиологическими особенностями региона жизнедеятельности. Отклонения в состоянии равновесия, которые сопровождаются качественными и/или количественными изменениями состава микрофлоры определенного биотопа, обусловлены как эндогенными, так и экзогенными причинами, как правило, означают нарушение гомеостаза и нередко манифестируют клинически.

Целью нашего эксперимента было изучение іn vitro влияния культуры Saсcharomyces boulardii (S.b.) на размножение и жизнеспособность клинических штаммов микроорганизмов, выделенных из тощей кишки.

Энтерол 250 — препарат, содержащий лиофилизированные штаммы лечебных дрожжей — Saccharomyces boulardii, со следующими свойствами:

— антимикробное действие;

— антитоксическое действие за счет нейтрализации бактериальных цито- и энтеротоксинов;

— антисекреторное действие (уменьшение секреции воды и солей);

— повышение местной иммунной защиты за счет увеличения продуцирования IgA;

— трофический эффект по отношению к слизистой оболочке тонкой кишки вследствие освобождения спермина и спермидина.

Таким образом, Энтерол 250 оказывает не только биологически обусловленное восстановительное и защитное влияние на нормальную кишечную флору, но и выраженное этиопатогенетическое антидиарейное действие (Sazawal S. et al., 2006).

Выбор пробиотика базировался на результатах бактериологических исследований. Энтерол 250 (Saсcharomyces boulardii) проявляет антимикробную активность [2–4] по отношению к Pseudomonas aeruginosa, Clostridium difficile, Cl.рneumoniae, Cl.сlostridium pseudotropicalis, Clostridium krusei, Candida ablicans, Staphilococcus aureus, Proteus, Escherichia coli, Salmonella typhi (in vitro), Salmonella typhimurium, Salmonella enteritidis, Shigella dysenteriae (in vitro) , Shigella flexerni, Enthamoeba histolitica, Giardia lamblia. Кроме этого, Энтерол обладает генетической и естественной резистентностью к антибиотикам (Altwegg, 1992; Bergogne-Berezin, 1995). В связи с этим данный препарат показан для профилактики и лечения антибиотикассоциированного дисбиоза кишечника. Энтерол — единственный пробиотик, который изучался в двойных слепых плацебо-контролированных исследованиях (Roffe, 1996).

Материалы и методы

Лиофильно высушенная культура Saсcharomyces boulardii [1–3] предлагается для использования в комбинации с антибиотиками с целью профилактики синдрома избыточного роста бактерий в тонкой кишке.

Исследование включало:

1-й этап: отбор культур микроорганизмов (выбранные штаммы во временном промежутке до 24 ч доставлены в бактериологическую лабораторию для проведения количественного посева; полученные штаммы бактерий были полирезистентными к антибиотикам (причем все штаммы были резистентными к гентамицину и ампициллину), а количество микроорганизмов составило не меньше 5 ´ 105). Выбранным критериям отвечали следующие штаммы: Candida ablicans, S.аureus, Ps.аeruginosa, E.coli, E.сlоасае, K.рnеumоnіае, C.koseri.

2-й этап: подготовка культур. Для эксперимента приготовлены 18-часовые культуры бактерий и грибов, выращенные на мясопептонном бульоне (МПБ); для культивирования грибов рода Candida к МПБ добавляли 1% раствор мальтозы; к 5 мл стерильного бульона добавляли содержимое одной колонии культуры, предварительно выращенной на мясопептонном агаре (МПА); грибы Candida культивировали на агаре Сабуро; культуру Saсcharomyces boulardii получали из препарата Энтерол 250 путем разведения в физиологическом растворе для получения соответствующей концентрации.

Антагонизм проверялся в следующих условиях эксперимента:

— Эксперимент № 1: исследуемые микроорганизмы (10 6 КОЕ/мл) вносили в стерильный физиологический раствор (равноценные условия для исследуемых культур), к которому добавляли культуру Saсcharomyces boulardii для получения концентрации 5 ´ 106.

— Эксперимент № 2: исследуемые микроорганизмы (10 2 КОЕ/мл) вносили в стерильный МПБ, к которому добавляли Saсcharomyces boulardii для получения конечной концентрации 5 ´ 106.

— Эксперимент № 3, 4: исследуемые микроорганизмы (102 КОЕ/мл) вносили в стерильный МПБ с гентамицином (опыт № 3) и ампициллином (опыт № 4), к которому добавляли Saсcharomyces boulardii для получения конечной концентрации 5 ´ 106.

Для контроля использовали пробирку с культурой исследуемых микроорганизмов без Saсcharomyces boulardii.

Последующие 3–5-й этапы были общими для всех экспериментов:

— 3-й этап — проводили количественный посев на селективные среды;

— 4-й этап — смесь инкубировали в термостате в течение 24 часов;

— 5-й этап — проводили количественный посев на селективные среды.

В качестве селективной среды для Candida ablicans использовали агар Сабуро, для S.аurеus — желто-солевой агар, для энтеробактерий (E.coli, E.сlоасае, K.рnеumоnіaе и C.koseri) — агар Эндо, для псевдомонад Ps.aеruginosa — МПА с нистатином для угнетения роста Saсcharomyces boulardii.

На среды засевали разные разведения и подсчитывали колонии. С целью достоверности проведенных исследований опыты проводили трижды.

Результаты исследования, полученные при проведении эксперимента, отображены в табл. 1, 2. Они свидетельствуют о том, что антагонизм Saсcharomyces boulardii наиболее выражен в физиологическом растворе (без питательной среды для исследуемых бактерий). Применение Saсcharomyces boulardii с антибиотиками подтвердило синергичное антагонистическое действие Saсcharomyces boulardii, что свидетельствует о целесообразности их применения в комбинированной антибактериальной терапии, направленной на снижение микробного обсеменения тонкого кишечника. Наиболее выраженное антагонистическое действие Saсcharomyces boulardii обнаруживалось относительно S.аureus, Ps.аеruginosa и E.coli, которые являются важными агентами в развитии инфекционных осложнений и диарейного синдрома (в том числе и эндогенного происхождения).

Выводы

1. Комбинированное применение антибактериальных препаратов и Sассhаrоmусеs boulardii (Энтерол 250) обеспечивает подтвержденное іn vitro, достоверное снижение микробного числа полирезистентных микроорганизмов, выделенных из тонкой кишки.

2. Использование медикаментозной терапии с включением в комплекс лечения Saсcharomyces boulardii (Энтерол 250) позволит достичь желательного клинического эффекта — профилактики синдрома избыточного роста бактерий в тонкой кишке.

Практична медицина. — 2006. —Т. 12, № 5. — С. 89-93.


Bibliography

1. Castex F., Corthier G., Jouvert S., Elmer G., Lucas F., Bastide M. Prevention of Clostridium difficile-induced experimental pseudomembranous colitis by Saccharomyces boulardii: a scanning electron microscopic and microbiological study // Journal of General Microbiology. — 1990. — 136. — 1085-1089.

2. McFarland L.V., Bernasconi P. Saccharomyces boulardii: A review of an innovative biotherapeutic agent // Microbial Ecology in Health and Disease. — 1993. — 6. — 157-171.

3. Plein K., Hotz J. Therapeutic effects of Saccharomyces boulardii on mild residual symptoms in a stable phase of Crohn's disease with special respect to chronic diarrhea — a pilot study // Zeitschrift f ü r Gastroenterologie. — 1993. — 31. — 129-134.


Back to issue